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详细介绍
| 品牌 | 其他品牌 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业 |
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?原理?：使用钙离子敏感荧光探针(如Fluo-3、Fluo-4)与Ca2?结合后产生荧光信号变化
?操作流程?：
探针负载：将细胞与荧光探针共孵育(通常30-60分钟)
洗涤去除多余探针
实时监测荧光强度变化(激发/发射波长约488/525nm)
?优势?：灵敏度高、可实时动态监测
?应用?：高通量分析群体细胞Ca2?浓度分布
?特点?：
结合荧光探针使用
可同时检测其他参数(如细胞周期)
?优势?：亚细胞分辨率，可定位Ca2?信号空间分布
?应用?：研究局部钙信号(如突触小体钙震荡)
?细胞状态?：建议使用对数生长期细胞(70-80%融合度)
?对照设置?：
阴性对照(无探针组)
阳性对照(钙离子载体处理组)
?探针浓度?：避免过度负载导致的细胞毒性
?检测时间?：根据信号动态范围确定(通常5-30分钟)
?温度控制?：维持37℃恒温环境
?基线校正?：扣除背景荧光
?标准化表达?：ΔF/F?=(F-F?)/F?
?动力学参数?：
峰值幅度
上升/下降时间常数
?避光操作?：荧光探针易光漂白
?钙缓冲系统?：控制胞外Ca2?浓度
?多参数验证?：建议结合电生理或分子生物学方法
?设备校准?：定期进行荧光强度标定
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